从肝脾论治成年女性特应性皮炎

目的:特应性皮炎的发病及治疗存在很大的异质性,在治疗方面特别强调个体化治疗,本文主要总结成年女性特应性皮炎的治疗思路和方法。方法:基于肝脾两脏的生理、病理及成年女性特应性皮炎的临床表现,深入分析其病因病机及治疗方法。结果:女性成年特应性皮炎患者常肝脾同病,肝郁脾虚湿蕴和肝郁脾虚血弱是成年女性特应性皮炎的常见证型,临床可采用疏肝健脾祛湿法和疏肝健脾养血法进行治疗。典型病例中采用肝脾同调法不但可以改善患者的皮疹,也可有效缓解瘙痒和不良情绪。结论:肝脾同调法是治疗成年女性特应性皮炎的有效方法。     

丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

目的:探讨丹银海绵对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为8组。除空白对照组外,其余7组大鼠,通过手术在其背部形成一10mm×10mm相同大小,深达肌层的溃疡,分别给予抗生素、生长因子凝胶、纳米银、丹黄散,以及不同浓度的丹银海绵处理溃疡面。给药28d后处死大鼠,取溃疡部位新生肉芽组织,HE染色观察组织形态的变化;WesternBlot检测大鼠创面组织中AGEs、hs-CRP、IL-1、IL-6、bFGF、PDGF、VEGF表达水平。结果:病理切片观察显示适宜浓度的丹银海绵可以促进血管新生并伴扩张,同时生成大量新生成纤维细胞。WesternBlot检测显示高浓度的丹银海绵可以显著上调创面组织中生长因子表达(P<0.05),降低AGEs水平及炎症因子表达(P<0.05)。结论:适宜浓度的丹银海绵对于糖尿病大鼠皮肤溃疡的愈合有明显的促进作用,提高治疗效果。     

炎症反应与缺血性卒中

炎症反应是缺血性卒中后病理生理的核心内容，其过程涉及免疫和炎症细胞，不同途径 和来源的被激活的炎症因子共同参与。早期小胶质细胞、中性粒细胞被激活，随之淋巴细胞的聚集 和浸润也增加了对脑细胞的损伤；但也有研究发现，在特定刺激下，中性粒细胞可以从促炎表型向 抗炎表型转变，进而保护脑细胞；淋巴细胞中部分T细胞亚型可以抑制促炎因子的表达、调节淋巴细 胞的活性，从而起到脑保护作用。另外，在缺血性卒中后，除脑内局部的炎症反应外，外周循环的炎 性反应和免疫抑制也参与其病理机制。免疫调节有望成为未来缺血性卒中治疗的靶点。     

养血解毒方对银屑病角质形成细胞紧密连接的调节作用

目的:观察银屑病样小鼠皮损紧密连接蛋白中水闸蛋白(claduin-1,claudin-7),闭锁蛋白(occludin)的表达,明确养血解毒方对银屑病表皮通透屏障的修复作用,为养血解毒方治疗银屑病提供科学依据。方法:将C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、甲氨喋呤组、养血解毒方组,制备甲氨喋呤溶液、养血解毒方水煎剂对应灌胃干预,同时小鼠背部剃毛后给予咪喹莫特涂抹诱导银屑病样皮损模型。每日拍照记录皮损形态并对严重程度指数(PASI)评分;水油测试笔检测皮损表皮含水量;苏木素-伊红(HE)染色观察其病理改变、测量表皮厚度;免疫荧光法检测增殖相关的核抗原(Ki67);免疫组化法检测表皮兜甲蛋白(loricrin),真皮中CD3^+T淋巴细胞浸润和紧密连接蛋白claduin-1,claudin-7,occludin的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测皮损中claudin-7,occludin的表达。模拟银屑病皮损微环境,建立白细胞介素-17(IL-17,1 mg·L^-1)刺激的角质形成细胞(Hacat)模型,制作养血组分、解毒组分、养血解毒方喷干粉进行干预。采用细胞增殖毒性检测试剂盒-8(CCK-8)法检测药物对Hacat细胞的毒性;细胞免疫荧光法检测药物对角质形成细胞claudin-1,claudin-7,occludin表达的干预作用。结果:与模型组比较,养血解毒方可显著减轻小鼠银屑病样皮损表现,降低PASI评分及皮损表皮厚度(P<0.01),增加皮损区表皮水分含量(P<0.01),减少表皮ki67,loricrin的异常表达和真皮CD3+T细胞浸润(P<0.01),并增加紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05),增加紧密连接结构的完整性;体外研究发现,与模型组比较,养血解毒方组和养血组分组明显升高紧密连接蛋白claudin-1,claudin-7,occludin的表达(P<0.05);与模型组比较,解毒组分组蛋白表达水平无统计学差异。结论:养血解毒方通过调节角质形成细胞间紧密连接的表达抑制其异常的增殖分化过程,进一步恢复破坏的表皮通透屏障,可能是其治疗银屑病的作用机制之一。其中养血解毒方的养血组分对调节紧密连接的修复起主要作用。     

基于医院信息系统的乳腺癌临床特征及中西医用药特征分析

目的 解析真实世界中乳腺恶性肿瘤患者的人群特征、诊断特征、中西医用药特征，为乳腺癌的临床防治提供参考。方法 采集2002年2月至2015年5月全国60家三级甲等医 院信息系统（Hospital Information System，HIS）中，出院诊断为“乳腺癌”的患者用药信息，采用SAS9.3统计软件，对人口学信息、诊断信息、医嘱用药信息等进行描述性分析。结果 39798例乳腺癌患者，平均年龄（50.93者，平均年龄）岁；多以门诊入院，入院病情以“一般”为主;合并疾病主要为高血压，骨肿瘤，联用西药以抑制肿瘤细胞增殖、治疗并发症、缓解放化疗不良反应为主；中医辨证以痰瘀互结证，气阴两虚证，肝气淤滞证，脾气亏虚证型最为常见，临床清热解毒剂、益气扶正剂，活血化瘀剂应用较多。结论 乳腺癌中西医结合治疗，联用药物广泛，临床治疗基本符合临床指南。     

程序性死亡受体1和程序性死亡受体配体1在非小细胞肺癌组织中的表达情况及临床意义

目的探讨程序性死亡受体1(PD-1)和程序性死亡受体配体1(PD-L1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及临床意义。方法选择150例NSCLC患者的NSCLC组织及其癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两种组织中PD-1 mRNA和PD-L1 mRNA的相对表达量。采用免疫组织化学染色法检测NSCLC组织中PD-1和PD-L1的表达情况,分析PD-1和PD-L1表达情况与患者临床特征的关系。采用流式细胞术检测NSCLC组织和癌旁组织中CD4^+-PD-1、CD8^+-PD-1、CD14^+-PD-L1、CD68^+-PD-L1的表达水平。结果NSCLC组织中PD-1 mRNA和PD-L1 mRNA的相对表达量分别为(5.03±1.92)和(4.95±1.09),分别高于癌旁组织的(1.72±0.81)和(1.25±0.24),差异均有统计学意义(P﹤0.05)。TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移、有远处转移的NSCLC患者NSCLC组织中PD-1和PD-L1的高表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、高+中分化、无淋巴结转移、无远处转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。NSCLC组织中CD4^+-PD-1、CD8^+-PD-1、CD14^+-PD-L1、CD68^+-PD-L1的表达水平均明显高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论PD-1和PD-L1在NSCLC组织中高表达,可能成为一种新的生物标志物,PD-1/PD-L1信号通路可能参与了NSCLC的免疫逃逸过程,对其逃逸机制进行研究可以为NSCLC患者的临床治疗提供新靶点。     

lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制研究

目的:探讨lncRNA 178030.2通过TRPS1对三阴性乳腺癌细胞紫杉醇耐药的影响与机制。方法:采用逐步增加剂量间歇作用的方法诱导三阴性乳腺癌紫杉醇耐药细胞系并命名为MDA-MB-231/R。采用定量PCR和Western blot检测耐药细胞和亲本细胞中lncRNA 178030.2和TRPS1的表达；应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；RIP实验检测lncRNA 178030.2是否与TRPS1相结合；MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2小干扰RNA si178030.2和对照siNC转染至MDA-MB-231/R细胞，分别为干扰组和对照组，定量PCR检测lncRNA 178030.2水平的变化，分别用定量PCR和Western blot检测TRPS1 mRNA及蛋白水平的变化；MTT法检测MDA-MB-231/R细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。应用Lipofectamine 2000将TRPS1过表达质粒pcmv-TRPS1和对照质粒pcmv转染至MDA-MB-231细胞，分别为高表达组和对照组，分别用定量PCR和Western blot检测两组细胞中TRPS1 mRNA及蛋白水平的表达情况，然后再分别应用Lipofectamine 2000将lncRNA 178030.2高表达质粒pcmv-178030.2转染入两组细胞，MTT法检测MDA-MB-231细胞对紫杉醇的敏感性及细胞增殖。结果:成功构建在3 μg/ml紫杉醇中稳定生长的三阴性乳腺癌耐药细胞系MDA-MB-231/R。定量PCR结果显示:lncRNA 178030.2在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显高于在其亲本细胞MDA-MB-231中的表达；定量PCR和Western blot显示:TRPS1 mRNA和蛋白在紫杉醇耐药细胞系MDA-MB-231/R中的表达明显低于在其亲本细胞系MDA-MB-231中的表达；与对照组相比，高表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231细胞中TRPS1表达下降，细胞对紫杉醇的敏感性降低，细胞增殖增强，且lncRNA 178030.2确实可以与TRPS1相结合；与对照组相比，低表达lncRNA 178030.2组的MDA-MB-231/R细胞中TRPS1表达升高，细胞对紫杉醇的敏感性升高，细胞增殖减弱；在MDA-MB-231细胞中过表达TRPS1后再过表达lncRNA 178030.2，其促进紫杉醇耐药、促进细胞增殖的作用也明显减弱。结论:lncRNA 178030.2促进三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的紫杉醇耐药，促进细胞增殖，其发生机制可能与下调TRPS1的表达有关。     

Woolly hair nevus caused by somatic mutation and Costello syndrome caused by germline mutation in HRAS: Consider parental mosaicism in prenatal counseling

Germline mutations in HRAS cause Costello syndrome (CS), while mosaic mutations in HRAS show a variability of phenotypes, ranging from mild features such as keratinocytic epidermal nevus (KEN), sebaceous nevus (SN), woolly hair nevus (WHN) with KEN, to severe manifestations of CS with cutis laxa. We report two individuals. The first was a 2-year-old boy with woolly hair nevus (WHN) without any other cutaneous involvement, in whom somatic HRAS mutation (c.34G>A; p.Gly12Ser) was identified in his affected scalp and hair follicle specimens. This is the first reported WHN type 1 (no cutaneous involvement) patient caused by somatic HRAS mutation. The other individual was a 12-year-old girl with CS caused by germline HRAS mutation (c.34G>A), that manifested with coarse face, palmoplantar keratoderma, deep palmar and plantar creases, hyperpigmented patches, asymmetry and deformity of lower limbs, atopic dermatitis, as well as mental retardation. Of note, a linear hyperpigmented plaque was observed in her father’s lumbosacral region. Although the father refused to provide semen and skin tissue for further examination, this reminds us of possible mosaicism in parents of individuals with germline de novo HRAS mutation and underlines the importance of parental evaluation for prenatal counseling.     

The activity prediction of indole inhibitors against HCV NS5B polymerase

Non‐structural viral protein 5B (NS5B) is a viral protein in hepatitis C virus. Although various inhibitors against NS5B have been found, the activity prediction of similar untested inhibitors is still highly desirable. In this respect, the Tchebichef moments (TMs) calculated from the images of molecular structures were regarded as the independent variables while the inhibitory activity (pIC₅₀) was the dependent variable, and the predictive model was established by means of stepwise regression. The R‐squared of leave‐one‐out cross‐validation (Q²) for the training set and the R‐squared of prediction () for external independent test set were 0.919 and 0.927, respectively. The obtained model was also evaluated strictly. Compared with the multivariate curve resolution with alternating least squares (MCR‐ALS) and the QSAR approaches derived from the literature, the proposed method is more accurate and reliable. This study not only provides an effective approach to predict the biological activity of RNA replication's inhibitors, but also extends the QSAR modeling technique.